小鼠破骨細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)過程中的威脅就是細(xì)胞污染，凡是混入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中，對細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染。細(xì)胞一旦遭到污染，所有的實驗結(jié)果都會變得毫無意義。因此，及時檢測并鑒定出所培養(yǎng)的細(xì)胞是否被污染至關(guān)重要。
細(xì)胞培養(yǎng)實驗室要求保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室要相對封閉，潔凈無塵，設(shè)有緩沖間。
對實驗室進(jìn)行定期清掃、紫外消毒是避免細(xì)胞培養(yǎng)過程中由于實驗室環(huán)境引起細(xì)胞污染的主要措施，此外，實驗室內(nèi)不要放太多雜物，保持實驗室干燥，有利于降低因?qū)嶒炇覘l件引起的細(xì)胞污染率。
小鼠破骨細(xì)胞培養(yǎng)過程中實驗人員是否操作規(guī)范，是否嚴(yán)格遵守?zé)o菌工作流程，是細(xì)胞污染的一個主要因素。操作人員進(jìn)培養(yǎng)室前，必須先洗手，在緩沖間換穿專用實驗服和拖鞋，嚴(yán)禁在實驗進(jìn)行時頻繁出入培養(yǎng)室。實驗后應(yīng)將實驗產(chǎn)生的廢物和廢液及時清理出培養(yǎng)室，并清潔無菌工作臺。
細(xì)菌和真菌污染很容易被檢測，因為受到細(xì)菌、真菌污染的細(xì)胞，培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基會出現(xiàn)肉眼可見的明顯特征。細(xì)菌污染會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁、顏色改變以及pH值急劇變化，受污染的貼壁細(xì)胞在幾天內(nèi)會逐漸脫壁死亡。真菌污染后的細(xì)胞生長速度變慢，培養(yǎng)基中會漂浮白色、淺黃色或黑色的小點(diǎn)。
因此，通過觀察培養(yǎng)基的顏色、漂浮物、pH值或在顯微鏡下觀察小鼠破骨細(xì)胞及其生長狀態(tài)，從而能初步判斷該細(xì)胞是否受細(xì)菌、真菌污染。
也可以使用培養(yǎng)檢測法：將細(xì)胞培養(yǎng)物在各類培養(yǎng)基中適溫培養(yǎng)若干天后，觀察是否有細(xì)菌或真菌生長。
更新時間：2022-10-13
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